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凱氏定氮儀基本原理及其校準(zhǔn)應(yīng)用

點(diǎn)擊次數(shù):2078 更新時(shí)間:2022-06-22

1  凱式定氮儀工作原理結(jié)構(gòu)
凱式定氮儀作為一種依照凱式定氮法基礎(chǔ)上所設(shè)計(jì)的儀器,主要運(yùn)用于對混合物、化合物內(nèi)總氮含量的測量。能夠?qū)崿F(xiàn)對于現(xiàn)有所處的催化劑條件下,通過運(yùn)用液標(biāo)準(zhǔn)完成測定,通過計(jì)算酸的消耗量能夠完成樣品內(nèi)的含氮量計(jì)算。由于蛋白質(zhì)的含氮量系數(shù)計(jì)算較為恒定,能夠依照氮含量與換算系數(shù)相乘,可得蛋白質(zhì)總含量,作為該方法定量測定蛋白質(zhì)比較經(jīng)典。
1.1 消化
(見圖1)作為比較傳統(tǒng)的凱式定氮法消化、蒸餾裝置。通過在燒瓶內(nèi)混合加入樣品證能夠浸潤樣品。并置于燒瓶在經(jīng)過預(yù)熱至420℃消化單元內(nèi),直至經(jīng)過消化處理燒瓶內(nèi)消化液呈現(xiàn)透明澄清藍(lán)綠色,長達(dá)0.5~1h的繼續(xù)加熱轉(zhuǎn)變樣品內(nèi)存在的有機(jī)氮,直至生成無機(jī)氮-銨[3]。
1.2 蒸餾
對于消化液取下放冷,在加入至50mL水內(nèi),將50mL稱取后加入至接收瓶內(nèi),然后將混合指示劑加入其中。將蒸餾裝置連接好之后將5mL過溶液加入至消解燒瓶內(nèi),可以中和成為所需運(yùn)用,之后蒸餾過程開始。轉(zhuǎn)化消化液內(nèi)存在的銨銀形成氮餾出,之后可以被過量所吸收[4]。
1.3 滴定及計(jì)算
通過運(yùn)用酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,滴定洗手液直至終點(diǎn),對其中存在的氮、蛋白質(zhì)含量計(jì)算公式如下[5]:
式中:氮含量用N表示;滴定試樣所需的標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積用V1表示;滴定空白所需的標(biāo)準(zhǔn)酸溶液用V0表示;對標(biāo)定時(shí)溶液濃度用c表示;試樣的質(zhì)量用m表示;試樣消化液的總體積用V表示;試樣內(nèi)的消化液蒸餾所需體積用v表示。
通過計(jì)算之后進(jìn)行不同試樣種類,氮含量與對應(yīng)氮換算所得蛋白質(zhì)系數(shù)相乘,即可得出蛋白質(zhì)含量。

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